豆腐木的组培快繁和驯化移栽

作者： [杨凉花 ]　　文章来源： [本站原创]　　点击数：[1640]　　更新时间：[2013-12-24]

豆腐木又名豆腐柴，臭黄荆，因民间对豆腐柴的加工利用是制成“神仙豆腐”，所以通常称为神仙叶子树，系马鞭草科，属落叶灌木类，是一种药食兼用植物，安全性高，既可作为天然果胶的原料，也可作为功能食品开发，又可作为一种药材使用，含丰富的果胶、植物蛋白质、糖类等营养成分，而且含有木栓醇、柚皮素、香草酸等多种药用成分，其根、茎、叶均可入药，民间常用来治疗蛇咬伤、创伤出血、牙痛、烧伤及痢疾等症，其叶提取物具有抗疲劳、降低胆固醇等功效，其根提取物也具有增强免疫力等功能。主要分布于我省南部山区的林下、沟边、灌木丛中，阴坡多于阳坡。豆腐柴作为一种具有重要营养价值和药用价值的野生植物资源，近年来逐渐引起了人们的关注，采取组织培养方法，可有助于进行快速繁殖。

1、材料和方法

1.1 材料

外植体来源：带腋芽嫩茎。

1.2 培养条件

温度：一般用20~30℃恒温培养。

光照：光照时间为每天12小时，光照度2000Lx。

基本培养基：用MS为基本培养基，生根培养用1/2MS，再附加各种激素，灭菌前PH为5.6~5.8，蔗糖浓度为30g/L，琼脂浓度为0.7g/L。

2、生长与分化情况

2.1外植体的处理

于晴天选取生长健壮、无病虫害的植株，取幼嫩芽段，剪除大叶片，置入烧杯中，滴入少许洗涤剂和吐温20，在流水条件下冲洗30分钟，送入无菌接种间，放在超净工作台上，用75%

酒精灭菌30秒，再用0.1%升汞灭菌8~12分钟，无菌水冲洗4~5次，无菌滤纸吸干表面水

分，用解刨刀切去基部受损的组织，再切成0.5~1.0cm的带腋芽茎段待用。

2.2芽诱导培养

将经过无菌处理好的材料分别接种在培养基（1）MS+BA1.5mg/L（单位下同）+IAA0.1（2）MS+BA1.0+IAA0.2（3）MS+BA0.5+IAA0.3上，经过10~15天的培养，所有培养基均能萌动生长，在培养基（1）上经过12天开始陆续分化出芽，在培养基（2）上约15天形成不定芽，但同时有少量不定根形成，在培养基（3）上速度最快，约10天就明显伸长，分化出芽，结果表明，培养基（3）诱导效果最佳，用的时间最短，适宜初代培养，详情见表2-1。表2-1不同激素量对豆腐柴的诱导情况

培养基	培养数（株）	出芽数（个）	培养天数（天）	诱导率（%）
1	50	16	12	30
2	50	25	15	50
3	50	40	10	80

2.3继代增殖培养

培养30天以后，待诱导出的小苗长至一定程度，剪成一叶一节的小芽，分别接种到培养基（4）MS+BA1.0+NAA0.6（5）MS+BA1.5+NAA0.4（6 ）MS+BA1.0+NAA0.2上，每瓶接种4~6个，培养20天左右，经观察比较，在培养基（4）上增殖倍率为5.8，在培养基（5）上增殖倍率为2.4，在培养基（6）上增殖倍率为3.2，结果表明，培养基（4）上增殖效果最佳，详情见表2-2。不断将芽转接进行继代培养，从而可以扩大培养规模，建立快繁增殖体系。

表2-2不同激素量对豆腐柴增殖倍率的影响

培养基	接种数（株）	20天后增殖总数（株）	增殖率（%）
4	45	218	5.8
5	45	97	2.4
6	45	125	3.2

2.4生根培养

将生长健壮的幼苗分别转接到培养基（7）MS+BA2.0+NAA0.3和培养基（8）MS+BA2.5+IBA0.5上进行诱导生根， 经过8~12天培养，在培养基（7）上生根率为100%，平均生根数5条，在培养基（8）上经过16天方开始生出少量细根，生根率为85%，平均生根数3.9条，由此观察比较可知，1/2MS对豆腐柴的生根有很大影响，在培养基（7）上生根快，根粗而多，且植株健壮，在培养基（8）上也能生根，但数量较少，苗瘦弱，选用培养基（7）生根效果最好。详情见表2-3。

表2-3不同培养基对豆腐柴生根的影响

培养基	生根天数（天）	生根率（%）	平均生根数（条）	长势
7	10	100	5	粗壮
8	16	85	3.9	细弱

3、瓶苗的移栽

生根组培苗不能直接移栽到大田，由于长期生长在恒温、无菌和养分供应充足的条件下，虽然也含有叶绿素，但是以异样生长为主，生长势较弱，必须进行一段时间的炼苗，具体方法是将生长健旺的生根瓶苗在自然温度和光照下闭瓶炼苗14天，然后再打开瓶盖炼苗7天左右，用镊子取出小苗，防入30~32温水中洗去附着的培养基，生根粉沾幼苗，移栽于用100倍液多菌灵处理过的苗床上，苗床温度保持在22~28℃之间，空气湿度保持在85~90%之间，移栽成活率达85%以上。

参考文献：

[1] 李鹤春; 李成雁等.龙吐珠组培快繁技术初探 [J] 安徽农业科学2009（21）;

[2] 李春华; 廉宏.金叶莸的组织培养繁殖技术研究 [J] 园林科技2009（04）;

[3] 李旭群；李曦等.穗花牡荆的组织培养[J]植物生理徐通讯 2009（11）;

[4] 姚宏；刘南祥等.大叶紫珠的组织培养与快速繁殖[J]植物生理学通讯 2008（01）.

作者简介：杨凉花（1976-），女，本科学历，助理农艺师，安康市农科所职工，从事植物组织培养研究工作。联系电话：13679155068