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技术交流
植物组织培养技术
作者: [陈国爱]  文章来源: [本站原创]  点击数:[1252]  更新时间:[2010-08-16]

植物的组织培养技术是克隆技术的一种形式,传统的动植物繁殖都是通过雌雄性交换物质完成的,也叫做有性繁殖,而组织培养技术则是通过某一植物的胚胎子细胞,通过组织培养进行复制“克隆”,即无性繁殖后代。“植物克隆”的目的:一是为了保护种质资源,减少品种退化,避免病毒、病菌的侵染。因为有些植物本身就是无性繁殖的植物,品种容易退化,不能向其它植物那样拥有适应环境,抵御病虫害的能力,面临着品种劣化等生存危机;二是能够加快育种速度和种苗繁殖速度,加快新品种,新技术的应用推广速度。

我所从1990年开始利用原植保室的陈旧设备进行组织培养技术研究,通过19年的组培研究,积蓄了丰富的组培基础理论与实践经验,形成了一支技术力量较强的专业骨干队伍,在所领导的正确领导和大力支持下,现已组建成年生产脱毒苗能力为100万株的种苗基地,至今,已成功地组培出甘薯、马铃薯、魔芋及各种名贵花卉和野生经济苗木等多个品种脱毒苗,并建立了无菌培养体系。

脱毒甘薯苗分别于2005年、200710月经江苏省徐州市甘薯研究中心的国家甘薯病毒检测试验室检测,脱毒率达93.3%。这一鉴定结果:一方面充分肯定我所的甘薯脱毒技术水平,另一方面也为加快甘薯脱毒苗在全市的应用推广提供了强有力的理论依据。现已在九县一区试验示范大面积推广,该技术主要是采取刚出土的幼苗或块茎上的幼芽,切下1—2cm长的茎尖,放在烧杯里加入少量的洗洁剂溶液,上面盖好沙布,在流水下冲洗30 min,然后在无菌条件下依次用酒精、次氯酸钠或升汞灭菌,再用无菌水冲洗3—5次,最后用无菌滤纸吸干水份,在双筒解剖显微镜下用解剖刀去掉幼叶,直至露出半光滑的生长点,用解剖刀从0.1—0.3mm处切下来,接到装有改良MA培养基的试管中,然后把试管口用棉花球塞上,上面再用牛皮纸包上帽,在纸帽上写上接种日期,放到试管架上,根据植物各自的生理特点和对生态环境的要求,在无菌、适当的温度和一定的培养条件下,使之生长,分化,通过30d以上的培养,在试管内慢慢地萌发幼芽,待小苗长到2--3cm长时,进行病毒检测,淘汰未脱去病毒的幼苗,保留无病毒苗,再将无病毒小苗剪成一叶一节的茎段转接到MS继代培养基上,附加适量的生长调节素,一定量的蔗糖,琼脂, PH值调5.8,光照强度10002000LX,光照时间1014h,培养温度(25±2)℃。30d转接一次,就这样一生十,十生百获得一定量脱毒苗后,通过一周的炼苗,洗去脱毒瓶苗根部的培养基,移栽至事先消毒处理过的苗床中,温度保持在22--23℃,相对湿度控制在85—95%,移栽成活率可达90%以上。